ब्रुसेलोसिस रोग का पशुओं में निदान
Sanjana
Phd Scholar, Division of Biological Products, ICAR-IVRI, Bareilly, UP
परिचय
ब्रुसेलोसिस सबसे उपेक्षित जूनोटिक रोग में से एक है। यह रोग ऐच्छिक इंट्रासेल्युलर Gram-negative बैक्टीरिया के कारण होता है जो ब्रुसेला जीनस के Proteobacteriaceae परिवार से संबंधित हैं। वर्तमान में, ब्रुसेला में बारह प्रजातियों को उनकी मेजबान वरीयताओं या संक्रमण के लक्षणों के अनुसार वर्गीकृत किया गया है: बी मेलिटेंसिस (बकरियां और भेड़), बी एबॉर्टस (मवेशी), बी सुइस (सूअर, हिरन और कृंतक), बी कैनिस (कुत्ते) , बी ओविस (भेड़), बी माइक्रोटी (लाल लोमड़ी और भेड़िये), बी नेओटोमे (कृंतक), बी इनोपिनाटा (अज्ञात), बी पिनीपेडियालिस (सील), बी सेटी (पोरपोइज़ और डॉल्फ़िन), बी पैपियोनिस (बबून) और बी वल्पिस (रेड फॉक्स)।
मनुष्यों में संक्रमण मुख्य रूप से B. abortus, B. melitensis और B. suis के कारण होते हैं। गोजातीय ब्रुसेलोसिस के लिए जिम्मेदार रोगजनक प्रजाति ब्रुसेला एबॉर्टस है और कैप्रिन या ओवाइन ब्रुसेलोसिस के लिए बी. मेलिटेंसिस है। इस रोग की विशेषता तीसरी तिमाही में गर्भपात, कमजोर संतान और बांझपन है। ब्रुसेलोसिस के कारण पशुधन क्षेत्र को लगभग 3.4 बिलियन अमेरिकी डॉलर का आर्थिक नुकसान हुआ है जो पशुधन क्षेत्र में 95% से अधिक नुकसान के लिए जिम्मेदार है। भारत में ब्रुसेलोसिस के कारण मनुष्यों में वार्षिक औसत हानि 10.46 मिलियन अमरीकी डालर है ।
संक्रमण
अन्य जानवरों में संचरण संक्रमित जानवर के सीधे संपर्क से या संक्रमित जानवर के निर्वहन से दूषित वातावरण के माध्यम से होता है। जीव दूध में बहाया जाता है, जो संतानों को ऊर्ध्वाधर संचरण का एक प्रमुख स्रोत है। यह रोग पशुधन मालिकों, बूचड़खानों के श्रमिकों, डेयरी श्रमिकों, चरवाहों, किसानों, पशु चिकित्सकों और प्रयोगशाला श्रमिकों के लिए एक व्यावसायिक खतरा है। मनुष्यों में रोग का संचरण मुख्य रूप से संक्रमित जानवरों के ऊतकों को संभालने और बिना पाश्चुरीकृत दूध / डेयरी उत्पाद के अंतर्ग्रहण के माध्यम से होता है, प्रयोगशाला श्रमिकों के मामले में, यह साँस द्वारा या त्वचा में दरार के माध्यम से होता है ।
संक्रमित माताओं से पैदा होने वाले लगभग 60% से 70% भ्रूण ऊर्ध्वाधर संचरण के माध्यम से संक्रमण करते हैं। ब्रुसेला जीव विभिन्न स्रावों जैसे वीर्य, दूध, गर्भाशय स्राव और कभी-कभी 2-3 साल तक मांस के माध्यम से उत्सर्जित होते हैं और वे झुंड के अन्य स्वस्थ जानवरों के संक्रमण के स्रोत के रूप में कार्य करते हैं।
गोजातीय ब्रुसेलोसिस गर्भ के अंतिम तिमाही के दौरान गर्भपात से जुड़ा हुआ है और कमजोर नवजात बछड़ों और गायों और बैलों में बांझपन पैदा करता है। ब्रुसेलोसिस पूरे देश में स्थानिक है, जिसमें पशुधन की विभिन्न प्रजातियों में 6.5% से 16.4% तक की बीमारी होती है। भारत में, लगभग 80% लोग घरेलू पशुओं या वन्यजीवों के निकट संपर्क में रहते हैं, ब्रुसेलोसिस जैसे जूनोटिक रोग संचरण के लिए एक महत्वपूर्ण जोखिम कारक। सेरोप्रेवलेंस अध्ययनों से पता चलता है कि संक्रमण 0.9% – 18.1% के बीच हो सकता है, जिसमें पशु चिकित्सकों और फार्म अटेंडरों में अधिक जोखिम होता है।
ब्रुसेलोसिस में चक्रीय संचरण क्षमताएं होती हैं जिसमें मानव, पशुधन और जंगली प्रजातियां शामिल होती हैं जो निकटता में रहते हैं। जंगली जानवर जो अक्सर घरेलू पशुओं की आबादी में प्रवेश करते हैं जैसे जंगली सूअर, हिरण और पक्षी घरेलू पशुओं में महामारी विज्ञान और बीमारियों को बनाए रखने में महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकते हैं ।
इसलिए, ब्रुसेला जीवों का दूध और वीर्य जैसे विभिन्न स्रावों और उत्सर्जन में जल्दी और तेजी से पता लगाना मनुष्यों और जानवरों को संचरण को रोकने में महत्वपूर्ण हो जाता है, जो कि बीमारी को नियंत्रित करने और मिटाने के लिए बहुत आवश्यक है। इन रणनीतियों में सहायता करने के लिए नैदानिक मामलों में ब्रुसेला प्रजातियों की पहचान करने के लिए शीघ्र, तीव्र, संवेदनशील और सटीक निदान विधियों की आवश्यकता होती है।
निदान
ब्रुसेलोसिस का निदान मुख्य रूप से प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष परीक्षणों द्वारा किया जाता है। प्रत्यक्ष परीक्षण में मुख्य रूप से पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन आधारित विधियों द्वारा माइक्रोबियल विश्लेषण और डीएनए का पता लगाना शामिल है। अप्रत्यक्ष परीक्षण या तो इनविट्रो (मुख्य रूप से दूध और रक्त के लिए) या इन विवो (एलर्जी परीक्षण) में किए जाते हैं।
आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले विभिन्न सीरोलॉजिकल परीक्षणों में स्टैंडर्ड ट्यूब एग्लूटिनेशन टेस्ट (एसटीएटी), रोज बंगाल प्लेट एग्लूटिनेशन टेस्ट (आरबीपीटी), 2-मर्कैप्टोएथेनॉल शामिल हैं। टेस्ट (2-एमई), मिल्क रिंग टेस्ट (एमआरटी), इनडायरेक्ट एलिसा, कॉम्प्लिमेंट फिक्सेशन टेस्ट (सीएफटी), और फ्लोरेसेंस पोलराइजेशन परख (एफपीए)। इनमें से एमआरटी, आरबीपीटी, एसटीएटी व्यापक रूप से ब्रुसेलोसिस के लिए स्क्रीनिंग टेस्ट के रूप में उपयोग किया जाता है। लेकिन ये सभी सीरोलॉजिकल टेस्ट एक या एक से अधिक कमियों से ग्रस्त हैं। एसटीएटी तटस्थ पीएच पर किया जाता है और यह आईजीएम का पता लगाता है इसलिए बहुत संवेदनशील है लेकिन क्रॉस-रिएक्टिविटी के कारण विशिष्ट नहीं है। कोई भी सीरोलॉजिकल परीक्षण टीकाकरण और संक्रमित जानवरों के बीच अंतर नहीं कर सकता है। इनमें से लगभग सभी परीक्षण विभिन्न सीमाओं से ग्रस्त हैं, इस प्रकार कोई भी व्यक्तिगत परीक्षण परिपूर्ण नहीं है। इसलिए पुष्टि के लिए परीक्षणों के संयोजन का उपयोग करना आवश्यक है।हालांकि, सीरोलॉजिकल परीक्षण की सीमाएं होती हैं, विशेष रूप से बीमारी के पुराने चरण में प्रवेश करने के बाद, जब जीव को इंट्रासेल्युलर रूप से आश्रय दिया जाता है, अक्सर सुपरमैमरी लिम्फ नोड्स और थन में। दरअसल, क्योंकि ब्रुसेला पारिस्थितिकी का सबसे महत्वपूर्ण पहलू एक इंट्रासेल्युलर प्रतिकृति जगह स्थापित करने और मेजबान प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं से सुरक्षित रहने की क्षमता है। सबसे महत्वपूर्ण मौजूदा सीरोलॉजिकल परीक्षणों में से कोई भी ब्रुसेला की विभिन्न प्रजातियों के बीच अंतर नहीं कर सकता है। इस प्रकार, एक सरल परीक्षण की सख्त आवश्यकता है, जिसमें रोगजनकों की विभिन्न प्रजातियों की पहचान करने की क्षमता हो। इस प्रकार, अधिक सटीक निदान और संक्रमण के संचरण को सीमित करने के लिए, सीरोलॉजी को एंटीजन आधारित डिटेक्शन एसेज़ द्वारा पूरक किया जाना चाहिए। बैक्टीरियोलॉजिकल या मॉलिक्यूलर डायग्नोसिस जीव का अलगाव, हालांकि स्वर्ण मानक माना जाता है, बहुत बोझिल, समय लेने वाला है, अत्यधिक कुशल कर्मियों की आवश्यकता है और बड़े पैमाने पर निदान के लिए मुश्किल है। यह कुछ कमियों से भी ग्रस्त है जैसे लंबी ऊष्मायन अवधि की आवश्यकता, कुछ पुराने मामलों में कम संवेदनशीलता और संक्रामक एजेंट के संपर्क में आने का जोखिम होता है। नैदानिक नमूने से अलगाव के प्रयास हमेशा उन मामलों में एक सच्ची तस्वीर नहीं देते हैं जब एक कम जीवाणु भार मौजूद होता है, एक बहुत पुराना और सड़ा हुआ नैदानिक नमूना संसाधित होता है, संस्कृति नकारात्मक हो जाती है ।जीवाणु रोगज़नक़ (एंटीजन) का पता लगाने के लिए कुछ वैकल्पिक तरीकों का पता लगाने की आवश्यकता है जो उच्च सटीकता के साथ सटीक निदान में मदद कर सकते हैं।उपरोक्त सीमा को ध्यान में रखते हुए, नैदानिक नमूनों में एंटीजन का पता लगाने के लिए न्यूक्लिक एसिड-आधारित परीक्षण (NAT) का व्यापक रूप से उपयोग किया गया है। न्यूक्लिक एसिड-आधारित परीक्षणों ने पीसीआर के आविष्कार के माध्यम से आणविक जीव विज्ञान की दुनिया में क्रांति ला दी है जो रोग के पुष्टिकरण निदान में सहायता करता है। पीसीआर सीधे नैदानिक नमूने से रोगज़नक़ का पता लगाता है इसलिए सीरोलॉजिकल या कल्चर तकनीकों के विकल्प के रूप में उपयोग किया जाता है। पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) और इसके वेरिएंट जैसी नई पीढ़ी की तकनीकों में रक्त संस्कृतियों की तुलना में अधिक संवेदनशीलता होती है और सीरोलॉजिकल परीक्षणों की तुलना में अत्यधिक विशिष्ट होती है। जीन bcsp-31, omp-2, IS711 और 16SrRNA को लक्षित करने वाले कई विशिष्ट विशिष्ट पीसीआर का उपयोग किया गया है। हालांकि पीसीआर और इसके वेरिएंट अत्यधिक संवेदनशील और विशिष्ट हैं, लेकिन इसका उपयोग देखभाल निदान के बिंदु के रूप में नहीं किया जा सकता है। थर्मल साइक्लर की आवश्यकता, प्रवर्धन के लिए लंबा समय, नमूनों में अवरोधकों की उपस्थिति संसाधन-सीमित सेटिंग्स में इसके उपयोग में बाधा डालती है। इसलिए देखभाल परीक्षण के बिंदु के रूप में उपयोग किए जाने के लिए गैर-पीसीआर आधारित परख होना आवश्यक है। मुख्य ध्यान अब नैदानिक परखों के विकास की ओर बढ़ रहा है जिसे क्षेत्र की स्थितियों में या क्लीनिकों में ‘देखभाल के बिंदु’ परीक्षणों के रूप में दोहराया जा सकता है। पॉइंट ऑफ़ केयर परीक्षण 1962 की शुरुआत में शुरू हुआ और बिना किसी देरी के परिणाम प्रदान करने के लिए रक्त शर्करा के स्तर (क्लार्क और लियोन, 1962) के निदान के लिए। पीओसी एक उपयोगकर्ता के अनुकूल प्रारूप है जिसका उपयोग केंद्रीकृत प्रयोगशालाओं की आवश्यकता के बिना रोग के तेजी से निदान के लिए किया जा सकता है। संसाधन-सीमित सेटिंग्स में पीओसी डायग्नोस्टिक उपकरणों के विकास से रोग की उचित जांच में मदद मिलेगी जिससे रोग के नियंत्रण में सहायता मिलेगी। WHO के अनुसार, संसाधन-सीमित सेटिंग्स में नैदानिक परीक्षण के लिए एक अनिवार्य आवश्यकता “ASSURED” (सस्ती, संवेदनशील, विशिष्ट, उपयोगकर्ता के अनुकूल, तेज़ और मजबूत, उपकरण मुक्त और अंतिम उपयोगकर्ताओं के लिए सुपुर्दगी योग्य) है। इसके अलावा, नैदानिक परीक्षण यह अंतर करने में सक्षम होना चाहिए कि कौन सी प्रजाति संक्रमित है और निम्न स्तर के संक्रमण का पता लगाने में सक्षम होना चाहिए। आज तक, ब्रुसेला एंटीजन का पता लगाने के लिए पीओसी परीक्षण के लिए कोई उपलब्ध परीक्षण उपलब्ध नहीं है। इन परीक्षणों को यदि विकसित किया जाता है तो दूध/योनि स्राव जैसे स्राव में जीवों की जांच के लिए एक पुष्टिकरण परीक्षण के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।
निष्कर्ष
भारत जैसे देश में जहां आबादी का 3/4 भाग पशु के निकट संपर्क में रहता है। नैदानिक परीक्षण होना आवश्यक है जो उस क्षेत्र में प्रजातियों के भेदभाव और बायोवर के प्रसार में सहायता करेगा जिससे सटीक निदान और उपचार में मदद मिलेगी। ब्रुसेला प्रजाति एक जूनोटिक रोगज़नक़ है और चूंकि ब्रूसेला जीनस की प्रजातियों के भीतर एक क्रॉस रिएक्शन है, इसलिए एक निश्चित मल्टीप्लेक्स पॉइंट ऑफ़ केयर परीक्षण होना आवश्यक है जो प्रजातियों के भेदभाव में सहायता करेगा। प्वाइंट ऑफ केयर टेस्टिंग (पीओसीटी) उपकरणों में कई लक्ष्य विश्लेषण का पता लगाना हाल के दिनों में रुचि प्राप्त कर रहा है क्योंकि यह एक उपकरण को डिजाइन करने में लागत को कम करेगा और संक्रमण के प्रसार को सीमित करने की क्षमता में सुधार करेगा। मल्टीप्लेक्स पीओसी डायग्नोस्टिक्स में रोग निगरानी कार्यक्रम की ताकत बढ़ाने की क्षमता है।
